(Fluxua zitometria, FCM) zelula-markatzaileen intentsitate fluoreszentzia neurtzen duen gelaxkaren analizatzailea da. Teknologia handiko teknologia garatu da zelula bakarreko analisian eta ordenazioan oinarrituta. Azkar neurtu eta sailkatu dezake tamaina, barne egitura, ADNa, ADNa, proteinak, antigioak eta zelulen propietate fisiko edo kimiko batzuk eta sailkapen horien bilduman oinarrituta egon daitezke.
Fluxuen zitometroa, batez ere, bost zatitan osatzen dute:
1 fluxu ganbera eta fluidoen sistema
2 Laser argi iturri eta habeen konformazio sistema
3 sistema optikoa
4 Elektronika, biltegiratzea, bistaratzeko eta aztertzeko sistema
5 zelulen sailkapen sistema
Horien artean, laser bidezko kitzikapen laser argiaren iturrian eta habeen eraketa sistemaren fluoreszentzien seinaleen neurketa nagusia da fluxu zitometrian. Ilusioaren argiaren intentsitatea eta esposizio denbora fluoreszentziaren seinalearen intentsitatearekin lotuta daude. Laser argi-iturri koherentea da, uhin bakarreko luzera, intentsitate handiko eta egonkortasun handiko argiztapenarekin. Baldintza hauek betetzeko kitzikapen argi iturri aproposa da.
Laser iturriaren eta fluxu ganberaren artean bi lente zilindriko daude. Lente hauek laser-izpi bat zuzentzen dute laser iturritik igortzen den zatiketa zirkular batekin, sekzio txikiagoa duten izpi eliptiko batera (22 μm × 66 μm). Izpi eliptiko honen barruan dagoen laser energia banaketa normal baten arabera banatzen da, laserra hautemateko eremutik igarotzen diren zelulen argiztapen intentsitate koherentea bermatuz. Bestalde, sistema optikoa lente, zulo eta iragazkien multzo ugariz osatuta dago, gutxi gorabehera bi multzotan banatuta egon daitezkeena: fluxu ganberaren gora eta behera.
Fluxu-ganberaren aurrean dagoen sistema optikoa lente eta zulo batez osatuta dago. Lentearen eta zuloaren funtzio nagusia (normalean bi lente eta pinhole) laser izpiak laser iturriak zeharkako habe eliptiko batean emititutako zeharkako zirkulu batekin bideratzea da. Laser-energia banaketa normal baten arabera banatzen da, laser bidezko detekzio eremuan zehar zelulen argiztapen intentsitate koherentea bermatuz eta argi-argiaren interferentziak minimizatuz.
Hiru iragazki mota nagusi daude:
1: Pass iragazkia (LPF) - Argi-luzerak soilik balio berariagina baino handiagoa da.
2: Pasabide motzeko iragazkia (SPF) - uhin-luzerak soilik balio ematen du balio zehatz baten azpitik.
3: Bandpass Filter (BPF) - uhin-luzera jakin batean soilik pasatzeko aukera ematen du.
Iragazkien konbinazio desberdinek uhin-luzera desberdinetan uhin-luzera desberdinetan zuzendu ditzakete fotomultiplier hodietara (PMTS). Adibidez, PMTren aurrean fluoreszentzia berdea (FITC) detektatzeko iragazkiak LPF550 eta BPF525 dira. Fluoreszentzia laranja-gorria (PE) hautemateko erabiltzen diren iragazkiak PMTren aurrean LPF600 eta BPF575 dira. PMTren aurrean fluoreszentzia gorria (CY5) detektatzeko iragazkiak LPF650 eta BPF675 dira.
Fluxuen zitometria zelula sailkatzeko erabiltzen da batez ere. Informatika teknologiaren aurrerapenarekin, immunologiaren garapena eta antigorputz monoklonalen teknologia asmatzea, biologia, medikuntza, farmazia eta bestelako eremuetan aplikazioak gero eta zabalagoak dira. Aplikazio hauek zelulen dinamika analisia, zelula apoptosia, zelula idaztea, tumorearen diagnostikoa, droga-eraginkortasunaren azterketa, etab.
Posta: 2012-23ko irailaren 21a
